生產(chǎn)上主要用組織分離法。將野外生長(zhǎng)的鮮靈芝采回，取其菌蓋或菌柄組織。或用栽培靈芝正在生長(zhǎng)著的子實(shí)體的一部分，用75%的酒精進(jìn)行表面消毒后，采用無(wú)菌操作切取其內(nèi)部組織為3-4毫米大小的塊。分別放置于平板綜合PDA培養(yǎng)基上。直徑9厘米培養(yǎng)皿內(nèi)勻開(kāi)放置4-5塊�；蛘咴诙嘀г嚬苄泵媾囵B(yǎng)基中部各放置一塊，使組織塊稍向下壓密切淺陷于培養(yǎng)基表面，就像植物種子淺播在卜壤上。在25-28℃暗培養(yǎng)3-4天，就會(huì)發(fā)現(xiàn)小塊組織周?chē)凶陨z長(zhǎng)出，即靈芝組織萌發(fā)的菌絲(如不是從組織塊萌發(fā)或發(fā)現(xiàn)其他顏色菌落則為雜菌)。這時(shí)可挑選純白無(wú)雜的靈芝菌絲先端，接種移植在新的斜面培養(yǎng)基上，仍在25-28℃暗培養(yǎng)，5-7天白色菌絲長(zhǎng)滿斜面，即得靈芝母種。靈芝菌絲本身是無(wú)色透明，有分隔及分枝的，表面常分泌有白色草酸鈣結(jié)晶。眾多菌絲聚集形成的菌落就呈白色。母種繼續(xù)在25-28℃培養(yǎng)，菌絲層會(huì)進(jìn)一步生長(zhǎng)增厚，后期會(huì)產(chǎn)生韌質(zhì)菌皮并產(chǎn)生黃色至淺棕色色素，此時(shí)菌種已老化，不易鉤取轉(zhuǎn)管，接新管后菌絲長(zhǎng)速也慢。所以，栽培靈芝時(shí)應(yīng)將分到的原始母種，在菌絲體滿斜面后就接轉(zhuǎn)新斜面，一般一支可轉(zhuǎn)20-30支。新斜面7天后又可長(zhǎng)滿菌絲，這時(shí)可作為擴(kuò)繁栽培種用外，應(yīng)留數(shù)支進(jìn)行保存，以備來(lái)年應(yīng)用。
母種可采用多種方法保藏，如用冰箱4-8℃低溫保藏;液體石蠟保藏;最簡(jiǎn)易可行的是膠塞法。即用1號(hào)白膠塞，經(jīng)高壓或常壓滅菌消毒后，在無(wú)菌條件下，拔去母種試管口的棉塞，換上白膠塞，并將試管上部及膠塞沾熔化的石蠟以密封保存即可。此種方法可不放冰箱，室溫干凈地方保存1-3年，斜面不干縮，菌種活力及出子實(shí)體能力均不變。
